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摘要
从霍乱疫苗菌中抽提基因组DNA ,用PCR的方法扩增zot基因。序列分析表明 ,zot基因编码 399个氨基酸 ,其中 4个氨基酸与文献报道有差异。将zot基因插入含T7启动子的质粒pET 2 8(a +)构建表达质粒 pET ZOT ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)筛选表达菌株BLZOT。表达菌株经 1mmol/LIPTG诱导表达 3～ 5h后 ,表达大量ZOT蛋白 ,并形成包涵体。经SDS PAGE分析重组ZOT蛋白分子量约为 47kD ,凝胶自动扫描分析表明 ,重组ZOT约占菌体可溶性蛋白量的 15 %以上。本工作为进一步研究蛋白多肽类药物的口服奠定了良好的基础。
- 出版日期2000
- 单位上海交通大学; 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
