MTH1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立

作者：马红梅; 谢显功; 刘海燕; 刘彦明; 肖洪广; 李宁; 范婷婷; 郑君德

来源：热带医学杂志, 2010, (12): 1390-1392+1401.

• MTH1
• RT-PCR
• MDCK MTH1
• RT-PCR
• MDCK

目的建立一个检测培养MDCK细胞内MutT同源蛋白1(MTH1)基因表达的半定量RT-PCR体系。方法细胞培养后提取总RNA,经优化RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的表达量。条带经ScionImmage软件分析并与内参基因GAPDH相比,对体系的准确性、重复性和灵敏度进行分析,然后运用本体系检测流感病毒感染后MDCK细胞内MTH1的表达。结果扩增产物经测序分析证实与GenBank中该细胞的MTH1基因序列一致;灵敏度检测发现最低可从50ng总RNA中检出目的基因的表达;重复性测定发现,MDCK细胞MTH1与GAPDH灰度值比值的均值为(2.02±0.09,n=10),CV值为4.31%。...

• 单位
  广州医科大学