大肠杆菌植酸酶appA2基因真核表达载体的构建及在细胞中的表达

作者：白立景; 鞠辉明; 牟玉莲; 杨述林; 李奎; 陈明勇

来源：中国兽医杂志, 2011, (07): 3-5.

• 植酸酶
• appA2基因
• 真核表达载体
• 表达 phytase
• appA2 gene
• eukaryotic expression vector
• expression

根据已经公布的植酸酶appA2基因序列,设计合成了1对特异性引物,应用RT-PCR技术从大肠杆菌中扩增得到植酸酶appA2基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1( )中,构建了重组真核表达质粒pcDNA-appA2,对重组表达质粒鉴定正确后,转染猪PK15细胞,经G418筛选后,通过实时荧光定量PCR检测细胞内appA2表达,同时测定细胞内植酸酶的活性,检测结果表明,本试验成功构建了pcDNA-appA2重组真核表达载体,转染细胞后appA2的表达量是对照组的1 686.55倍,同时具有较好的植酸酶活性,为通过生物反应器制备植酸酶研究奠定了基础。

• 出版日期2011
• 单位中国农业大学; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所