重组腺相关病毒转导外源基因入EB病毒转化的B淋巴细胞获长期表达

作者：史耕先刘音李琳朱立平

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2001, (06): 14-19.

• 腺相关病毒载体
• 转导
• 正义和反义6A8DNA
• EB病毒转化的B淋巴细胞 Adeno associated virus vector
• Sense and antisense 6A8 DNA
• Transduction
• EB virus transformed B cell

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包装后转导淋巴细胞 ,经G418筛选 ,用有限稀释法克隆转导成功的淋巴细胞。Northern杂交和RT PCR检测转导基因的mRNA表达水平。ConA结合试验检测细胞在转导基因后 6A8α 甘露糖苷酶活性的改变。结果　pAGX 反义6A8DNA及pAGX 正义 6A8DNA经包装获得了高复制滴度的重组AAV(rAAV)颗粒 ,藉助rA...

• 出版日期2001
• 单位中国医学科学院北京协和医院; 中国医学科学院基础医学研究所