基于16S rDNA测序探讨大黄?虫丸调控肠道菌群抑制大鼠肾纤维化的作用机制

作者：梁静涛; 王尧; 何晓艳; 李欣; 黄婧; 古铮铮; 肖静怡; 吴丽娟^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(22): 37-46.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231236

• 大黄?虫丸
• 肾纤维化
• 16S rDNA
• 肠道菌群

目的：从肠道菌群角度研究大黄?虫丸(DHZCW)对腺嘌呤诱导的肾纤维化大鼠的作用及机制。方法：将36只SD大鼠随机分为6组：空白组、模型组、大黄?虫丸高、中、低剂量组(0.168、0.084、0.042 g·kg-1)、吡非尼酮组(200 mg·kg-1)，每组6只。除空白组外，其余各组用腺嘌呤混悬液250 mg·kg-1灌胃造模28 d，再进行药物干预4周，在代谢笼中收集大鼠尿液，测定肾功能指标尿素氮(BUN)、尿素(Urea)、尿肌酐(Crea)、胱抑素C(Cys C)、24小时尿蛋白(24 h TP)。收集肾脏样本并对其苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色，观察各组大鼠肾组织病理变化，采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测关键效应蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)蛋白的表达量。收集大鼠粪便运用高通量测序16S rDNA技术对大鼠菌群进行物种差异性分析。结果：与空白组比较，模型组BUN、Urea、Crea、Cys C、24 h TP含量显著升高(P<0.01)，与模型组比较，DHZCW高、中、低剂量组和吡非尼酮组BUN、Urea、Crea、Cys C、24 h TP均显著降低(P<0.01)。与空白组比较，模型组肾组织中出现明显纤维化改变，α-SMA、ColⅠ、ColⅢ蛋白含量也显著升高(P<0.01)；与模型组比较，DHZCW高剂量组和吡非尼酮组组织结构基本正常，未见明显病理损伤改变，DHZCW中、低剂量组可见纤维化改变，低剂量组较为明显；DHZCW高、中、低剂量组和吡非尼酮组中的α-SMA、ColⅠ、ColⅢ蛋白含量显著降低(P<0.01)，说明DHZCW能有效减少胶原异常沉积而抑制肾纤维化。肠道菌群来看，门水平上，与空白组比较，模型组中厚壁菌门(Firmicutes)的丰度明显增加，拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度减少，二者比例明显失调。科水平上，模型组降低了毛螺菌科(Lachnospiraceae)、前蹄菌科(Prevotellaceae)、未分类拟杆菌科(Bacteroidota＿unclassified)，增加了瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)、乳杆菌科(Lactobacillaceae)、颤螺旋菌科(Oscillospiraceae)菌群的丰度。属水平上，模型组的未分类厚壁菌(Firmicutes＿unclassified)、未分类拟杆菌属(Bacteroidota＿unclassified)、普雷沃氏菌属＿UCG-001(Prevotellaceae＿UCG-001)等菌群丰度显著降低，UCG-005、梭状芽孢杆菌(Clostridia＿UCG-014＿unclassified)等菌群丰度增加。与模型组比较，DHZCW能降低潜在致病菌而升高有益菌丰度，调节肠道菌群。结论：DHZCW能有效改善肾功能和抑制肾纤维化，其作用机制可能与调节肠道菌群有关。

• 出版日期2023
• 单位公共卫生学院; 成都中医药大学; 成都中医药大学附属医院