人泛素结合酶9的原核表达与纯化

作者：卓越; 樊峥; 叶棋浓; 严景华

来源：生物技术通讯, 2007, 18(01): 19-21.

DOI：10.3969/j.issn.1009-0002.2007.01.006

• 人泛素结合酶9
• 表达
• 纯化

目的:表达和纯化高纯度的人泛素结合酶9(hUBC9)。方法:将hUBC9基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上并转化大肠杆菌BL21(DE3),于30℃、1mmol/LIPTG诱导4h,表达GST-hUBC9融合蛋白。用Glutathione-Sepharose4B柱分离GST-hUBC9融合蛋白,用鼻病毒3C蛋白水解酶切去GST-hUBC9融合蛋白的GST标签,再用FPLC分子筛层析法进一步纯化hUBC9。结果和结论:获得了重组表达质粒GST-hUBC9并在大肠杆菌中可溶性表达,经亲和层析、酶切、分子筛层析后获得了可溶的、高纯度的hUBC9,为进一步研究hUBC9的功能和结构奠定了基础。

• 出版日期2007
• 单位生命科学学院; 安徽农业大学; 军事医学科学院; 中国科学院微生物研究所