氯胺T法标记B7-2单抗6C8的方法学研究

作者：文正伟; 章斌; 苏成海; 吴星红

来源：温州医学院学报, 2008, (05): 438-442.

• 碘
• 同位素标记
• 抗原,CD80
• 抗体,单克隆

目的:建立125I标记B7-2单抗6C8的方法,探讨其最佳标记条件。方法:氯胺T法标记单抗6C8,改变标记条件:抗体的量分别为3μg、6μg、9μg、12μg;125I的活度分别为0.925MBq、1.85MBq、3.7MBq、7.4MBq、14.8MBq;CH-T的量分别为10μg、20μg、30μg、40μg、50μg;反应时间分别为30s、1min、2min、4min;每次实验均重复3次,根据实验结果调整标记条件。标记好后,找出最佳标记条件,在生理盐水和人血清中分别作不同时间的标记率稳定性测定,以30min、1h、2h、4h、6h、24h为时间点,选出标记率最高的时间点。纸层析法测定标记率及放化纯。结果:抗体量对标记率没有影响;Na125I3.7MBq时标记率为(74.53±5.12)%,放化纯为(90.40±3.01)%;CH-T20μg时标记率为(81.00±14.75)%,放化纯为(95.17±4.45)%;反应时间30s时标记率为(80.67±13.32)%,放化纯为(88.93±10.16)%。室温下放置3d标记率为(83.12±8.47)%,加入人血清后放置24h标记率为(5.23±0.90)%。结论:上述氯胺T法最佳标记条件为:Na125I3.7MBq,氯胺-T20μg,6C8抗体6μg,Na2S2O5100μg,反应时间30s。该方法具有较高的标记率和较差的稳定性。

• 出版日期2008-9-25
• 单位温州医科大学; 苏州大学附属第一医院