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摘要
目的探讨甘草提取物(GC-3)抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖及诱导HeLa细胞凋亡的机制。方法通过水提取、乙醇沉淀、大孔吸附树脂柱层析,分离提取GC-3;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GC-3对HeLa细胞增殖的影响;透射电镜观察GC-3诱导HeLa细胞凋亡的形态学改变;Western blot测定25μg/ml GC-3不同时间作用于HeLa细胞后,凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)表达水平的变化。结果 MTT检测结果表明,GC-3能够抑制HeLa细胞增殖且呈现出良好的时间剂量效应关系,其中GC-3作用于人HeLa细胞12 h、24 h和48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为35.21μg/ml、17.05μg/ml、12.07μg/ml,而对照组顺铂相对应的IC50分别为20.48μg/ml、7.34μg/ml、8.66μg/ml。电镜检测可见细胞表面绒毛脱失,细胞核内染色质凝聚、散在或边集,细胞的核浆比减少,胞质内可见空泡等明显的凋亡细胞特点。Western blot检测结果显示,随着GC-3(25μg/ml)作用时间的增加,PARP-1被激活剪切,其裂解蛋白Cleaved-PARP-1 24 kD表达水平随之增高,且从6 h时起即与正常对照组有显著性差异(P<0.05),呈现明显的时间效应关系。结论 GC-3在体外可明显抑制HeLa细胞的增殖和诱导HeLa细胞凋亡,PARP-1在该细胞分子凋亡机制中起重要作用。
- 出版日期2013
- 单位齐齐哈尔医学院附属第三医院; 公共卫生学院; 哈尔滨医科大学; 哈尔滨市南岗区疾病预防控制中心
