科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的：基于网络药理学探讨毒结清复方对多发性骨髓瘤（MM）的作用机制，并通过体外实验验证其重要通路的参与。方法：利用TCMSP、本草组鉴数据库筛选得到毒结清复方有效成分及其对应的靶标蛋白，在GeneCards数据库中获得MM疾病靶点，将药物的标靶蛋白与MM疾病靶点取交集后得到交集靶点，并构建交集靶点交互网络（PPI），使用Cytoscape的Cytohubba插件对PPI网络分析得到核心靶点，然后对核心靶点进行在线富集分析。使用毒结清含药血清干预RPMI8226细胞，利用CCK8检测毒结清复方对RPMI8226细胞增殖的影响，ELISA和Western blotting检测各组RPMI8226细胞Wnt/β-catenin信号通路中Wnt1、β-catenin、cyclinD1蛋白表达水平。结果：共得到毒结清复方有效成分90个及其对应的靶标蛋白415个，多发性骨髓瘤疾病靶点3 340个，药物-疾病交集靶点148个，核心靶点13个，KEGG富集得到155条，GO富集得到生物过程1 682条、分子功能98条、细胞成分36条。CCK8结果显示：与对照组比较，低、中、高剂量组RPMI8226细胞的OD值均明显降低（P<0.05），且存在剂量依赖性。ELISA结果显示：与对照组比较，低、中、高剂量组RPMI-8226细胞Wnt1、β-catenin、cyclin D1蛋白含量均明显降低（P<0.05），且呈剂量依赖性。Western blotting结果显示：与对照组比较，低、中、高剂量组RPMI-8226细胞β-catenin蛋白相对表达量均明显降低（P<0.05），且高剂量组RPMI-8226细胞β-catenin蛋白相对表达量明显低于低剂量组（P<0.05）。与对照组比较，中、高剂量组RPMI-8226细胞Wnt1、cyclin D1蛋白相对表达量均明显降低（P<0.05），且高剂量组RPMI-8226细胞Wnt1、cyclin D1蛋白相对表达量明显低于低剂量组（P<0.05），高剂量组RPMI-8226细胞Wnt1蛋白相对表达量明显低于中剂量组（P<0.05）。结论：毒结清复方可以抑制MM细胞增殖，其作用机制之一为通过抑制MM细胞中的经典Wnt信号通路来实现。
- 出版日期2023
- 单位广西中医药大学第一附属医院; 广西中医药大学
