弓形虫RH株热应激蛋白40基因的克隆与原核表达

作者：路静; 张念章; 田维鹏; 殷铭阳; 王瑞爱; 周东辉; 朱兴全; 翁亚彪

来源：中国兽医科学, 2014, (01): 73-77.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2014.01.013

• 弓形虫
• HSP40蛋白
• 克隆
• 原核表达
• 反应原性 Toxoplasma gondii
• HSP40protein
• cloning
• prokaryotic expression
• reactinogenicity

为研究弓形虫热应激蛋白40(TgHSP40)的生物学特性,采用RT-PCR方法从弓形虫RH株中扩增出TgHSP40基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化入表达菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。结果显示,重组菌可表达出分子质量约46ku的重组融合蛋白,在37℃、IPTG浓度为1.0mmol/L、诱导6h的情况下表达效果最好。重组蛋白经纯化后进行的Western-blot分析证实,表达、纯化的弓形虫RH株HSP40蛋白具有良好的反应原性,与弓形虫基因Ⅰ型的RH株、基因Ⅱ型的PRU株以及基因型为ToxoDB9的T...

• 出版日期2014
• 单位东北农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 华南农业大学; 湖南农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室