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摘要
目的:构建含Med19基因的过表达慢病毒栽体。方法:用PCR技术获得Med19基因片段,将其连接入酶切后的线性慢病毒栽体,转化感受态细胞进行PCR及测序鉴定。脂质体转染法共转染293T细胞,荧光显微镜及Western blot检测转染效率。包装成慢病毒,实时定量PCR检测病毒滴度。结果:成功获取Med19基因,测序证实所获取基因序列完全正确。荧光显微镜以及Western blot检测均证实pGC-FU-Med19携有正确的Med19基因,并能在293T细胞中表达。实时定量PCR检测病毒滴度为2×10~9TU/mL。结论:成功构建Med19基因慢病毒表达栽体,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 出版日期2011
- 单位苏州大学
