抗猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的鉴定

作者：赵鑫; 张鑫; 时红艳; 陈建飞; 迟延彬; 韩斆; 李长龙; 刘宁; 胡桂学; 冯力

来源：中国预防兽医学报, 2014, 36(04): 314-317.

• 猪传染性胃肠炎病毒
• 重组核蛋白
• 单克隆抗体
• 抗原表位

为制备抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达重组N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,经4次细胞克隆纯化后,获得两株稳定分泌抗重组TGEV N蛋白的MAb,命名为3D7和5E8。通过western blot和间接免疫荧光试验对MAb的免疫活性和特异性进行鉴定,结果表明两株MAb均能够与TGEV全病毒反应并且特异性良好。利用合成的多肽对N蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb 3D7识别的表位为241AGKGDVTRFYGARSSSANFG260;5E8为184NKKDDSVEQAVLAALKKLGV203。本研究制备了两株MAb并对其表位进行鉴定,为TGEV检测方法的建立和N蛋白功能的分析奠定了基础。

• 出版日期2014
• 单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 动物科学学院; 吉林农业大学