小鼠miR-214真核表达载体的构建及其鉴定

作者：施冰; LesElzenaar; RalphvanOort; YigalPinto

来源：中国临床保健杂志, 2013, (06): 634-635.

• 微RNAs
• 遗传载体
• 真核细胞
• COS细胞
• 小鼠 MicroRNAs
• Genetic vectors
• Eukaryotic cells
• COS Cells
• Mice

目的构建小鼠miR-214的pcDNA3.1(+/-)真核表达载体并在COS-7细胞中转染检测其表达。方法小鼠基因组DNA扩增得到miR-214序列,将酶切后的miR-214克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+/-),重组pcDNA3.1(+/-)-miR-214经过酶切和测序鉴定后转染COS-7细胞并应用萤光定量PCR法检测miR-214表达水平。结果小鼠miR-214真核表达载体序列分析完全正确;转染COS-7细胞后miR-214的表达水平可增加1.41倍。结论成功构建了pcDNA3.1(+/-)-miR-214真核表达载体并能在真核细胞中进行表达,为进一步进行miR-214的功能研究提...

• 出版日期2013
• 单位中国人民解放军陆军总医院