circCLK3/miR-216a-5p对乳腺癌MDA-MB-453细胞影响分析

作者：孙小虎; 刘燕; 曹旭晨^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2023, 30(22): 1337-1344.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.22.01

• 乳腺癌
• circCLK3
• miR-216a-5p
• 细胞增殖
• 凋亡
• 迁移
• 侵袭

目的 探讨circCLK3/miR-216a-5p分子轴对乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其可能作用机制。方法 收集2020-02-01-2022-05-31天津医科大学肿瘤医院63例经病理确诊为乳腺癌的患者癌及癌旁组织(距癌周≥5 cm)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测乳腺癌患者癌及癌旁组织标本与MDA-MB-453细胞中circCLK3和miR-216a-5p的表达量；体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-453,将si-NC、si-circCLK3、miR-NC和miR-216a-5p分别转染至MDA-MB-453细胞，将si-circCLK3+anti-miR-NC和si-circCLK3+anti-miR-216a-5p分别共转染至MDA-MB-453细胞；双荧光素酶报告实验检测circCLK3与miR-216a-5p的靶向关系；MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭能力；蛋白质印迹法检测MDA-MB-453细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达量。结果 与癌旁组织(0.96±0.13)相比，乳腺癌组织(2.37±0.38)中circCLK3的表达量升高，t=27.866,P<0.001;miR-216a-5p的表达量(1.03±0.14 vs 0.43±0.08)降低，t=29.535,P<0.001。与si-NC组比较，转染si-circCLK3上调miR-216a-5p的表达(t=29.684,P<0.001),抑制了细胞生长以及侵袭和迁移能力，t值分别为20.743、22.395和27.915,均P<0.001,增加了细胞凋亡，t=37.221,P<0.001。与miR-NC组比较，转染miR-216a-5p抑制了细胞生长以及侵袭和迁移能力，t值分别为21.266、28.590和27.756,均P<0.001,增加了细胞凋亡，t=36.884,P<0.001。与si-circCLK3+anti-miR-NC组相比，si-circCLK3+anti-miR-216a-5p组细胞克隆形成能力、迁移及侵袭能力均增强，t值分别为10.447、20.211和18.429,均P<0.001。结论 circCLK3敲除通过上调miR-216a-5p表达而抑制乳腺癌细胞生长、迁移及侵袭。

• 出版日期2023
• 单位天津市中医药研究院附属医院; 天津医科大学