游离二氧化硅(SiO2)粉尘刺激的RAW264.7巨噬细胞源性外泌体miRNA的表达差异

作者：杨红霞; 蒋恒波

来源：中国农村卫生, 2020, 12(24): 28.

• 外泌体
• 高通量测序
• 巨噬细胞

目的:探讨游离二氧化硅(sio2)粉尘刺激的RAW264.7巨噬细胞源性外泌体miRNA的表达差异。方法:以200mg/L的sio2刺激巨噬细胞48h(exo—48h组)后收集上清液,经过超速离心法提取上清中的外泌体;使用透射电镜进行扫码、纳米微粒跟踪分析技术、蛋白质印迹法鉴定外泌体;提取外泌体miRNA进行高通量测序;之后对于exo—co组与exo48 h组外泌体miRNA表达差异进行比较。同时预测靶基因,并分析GO和KEGG。结果:经过粒径检测,结果显示其体积峰度主要集中在40～100 nm。高通量测序共得到148个差异表达的外泌体miRNA。相较于exocontrol组而言,exo48 h组存在十分明显的上调现象,其中,miR-378d、miR-5106则出现下调。靶基因预测结果、GO和KEGG分析结果显示,靶基因主要集中在TGF-β信号通路、mTOR信号通路以及Wnt信号通路等。结论:SiO2诱导的巨噬细胞所产生的外泌体内含有十分丰富的miRNA,而表达差异显著,可能参与了动脉粥样硬化等过程。

• 出版日期2020
• 单位永州职业技术学院