摘要

目的研究秦艽、威灵仙及其配伍对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA FLSs)的抑制、促凋亡作用及对相关炎症因子的影响。方法将购得的RA FLSs复苏后,通过光学显微鉴定和Vimentin免疫荧光鉴定并传代培养,将生长密度为80%~90%的细胞随机分为空白组、阳性药(甲氨蝶呤)组、秦艽组、威灵仙组、秦艽-威灵仙药对组5组。将中药水煎液制成质量浓度为8000μg/m L的含药培养基,将阳性药制成质量浓度为400μg/m L的含药培养基,各组分别给予相应含药培养基进行干预,以CCK-8法检测各组RA FLSs的增殖活性,以Annexin V-FITC法检测各组RA FLSs的凋亡情况,以ELISA法检测各组RA FLSs培养上清液中类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)的含量。结果光学显微鉴定结果显示购得的RA FLSs形态符合文献报道,免疫荧光鉴定结果显示购得的RA FLSs为人源RA FLSs,且纯度大于99%; CCK-8法检测结果显示,各药物组对RA FLSs增殖均具有抑制作用,其中威灵仙组对RA FLSs的增殖抑制作用最强(P<0.01);Annexin V-FITC法检测结果显示,与空白组比较,各药物组RA FLSs凋亡率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),其中阳性药组RA FLSs凋亡率明显高于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);ELISA法检测结果显示,与空白组比较,各药物组RA FLSs培养上清液中RF、CRP的含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),其中威灵仙组RF的含量明显低于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论单味秦艽、单味威灵仙及秦艽-威灵仙药对对RA FLSs的增殖活性均具有抑制作用,并能促进RA FLSs凋亡,抑制RA FLSs培养上清液中RF和CRP的表达,其中在相同质量浓度下单味威灵仙在抑制细胞增殖和抑制RF分泌方面作用最强。

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