牛病毒性腹泻病毒E2结构蛋白的原核表达、纯化及鉴定

作者:范晴; 谢芝勋; 谢志勤; 刘加波; 庞耀珊; 邓显文; 谢丽基; 罗思思
来源:基因组学与应用生物学, 2014, (02): 234-238.
DOI:10.13417/j.gab.033.000234

摘要

根据GenBank中已发表的牛病毒性腹泻病毒囊膜糖蛋白E2基因设计1对特异性引物,以Oregon CV24株为模板,PCR扩增目的片断后与pET-32a原核表达载体连接,转化大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物,结果表明重组E2蛋白在体外得到较好表达,表达的融合蛋白分子量为57.7 ku。可溶性分析表明重组E2蛋白以包涵体的形式存在,经镍柱His标签蛋白纯化后进行western-blot检测。结果表明:E2重组蛋白均具有反应原性,能与BVDV的阳性血清进行反应。

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