拟南芥HyPRP蛋白AZI1在转基因烟草中的亚细胞定位及其对灰葡萄孢的抗性

作者：杜改亮; 高航; 徐子勤

来源：植物生理学报, 2012, (08): 795-803.

DOI：10.13592/j.cnki.ppj.2012.08.005

• AZI1基因
• ‘秦烟95’
• 亚细胞定位
• 灰葡萄孢
• DAB染色
• 台盼蓝染色 AZI1
• ‘Qinyan 95’
• subcellular localization
• Botrytis cinerea
• DAB staining
• trypan blue staining

通过农杆菌转化法得到了整合有拟南芥AZI1基因的烟草植株,进一步利用转基因烟草分析了AZI1蛋白的亚细胞定位及其对真菌病原体的抗性特征。在上下游引物5'端分别引入NcoI和SpeI酶切位点,采用高保真耐热DNA聚合酶Pfu从拟南芥Col-0生态型基因组DNA扩增AZI1基因的编码序列,用NcoI和SpeI对扩增片段和pCAMBIA1302质粒载体进行双酶切,通过T4DNA连接酶构建产生AZI1-GFP融合表达载体。用包含融合表达载体的农杆菌细胞转化烟草叶片,经潮霉素选择获得了完整的再生植株,并收取了T0代种子。激光共聚焦显微观察发现,AZI1蛋白主要定位于细胞表面。病原体侵染结果显示,AZI1...

• 出版日期2012
• 单位西北大学