多重PCR技术在橡胶树转基因分子鉴定中的应用

作者：李季; 黄天带; 华玉伟; 黄华孙

来源：热带作物学报, 2014, 35(05): 882-889.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2561.2014.05.010

• 多重PCR
• 橡胶树
• 转基因胚状体
• 转基因叶片
• 分子鉴定

为了同时检测橡胶树转基因胚状体和叶片中含有的多个目标基因序列,并排除扩增结果的假阴性,利用正交试验首次建立了橡胶树管家基因(HbActin)、目标基因新霉素磷酸转移酶II(NptII)基因和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因的多重PCR检测体系。利用2种酶(PCR Mix酶和Taq酶)对18个转基因胚状体和叶片进行单一引物PCR扩增和多重PCR检测。结果表明:多重PCR检测结果与单一PCR结果完全一致,且多重PCR体系带型清晰,无非特异性扩增,更易读取。多重PCR检测系统具有简单、准确并且高效等特点,只需要进行一个反应就可以检测多个目标基因序列,因而在转基因分子鉴定上具有非常重要的应用价值与潜力。

• 出版日期2014-7-8
• 单位农业部; 中国热带农业科学院橡胶研究所