circ＿0001879调控miR-599对脂多糖诱导HUVECs氧化应激损伤的影响

作者：田珺; 闵彬^*; 郭莉; 涂艳阳; 熊光华; 梁贵玲

来源：山东医药, 2023, 63(16): 42-46.

• 动脉粥样硬化
• 人脐静脉血管内皮细胞
• circ＿0001879
• 微小RNA-599
• 氧化应激损伤

目的 探讨circ＿0001879调控微小RNA-599(miR-599)对脂多糖（LPS）诱导人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）氧化应激损伤的影响。方法 体外传代培养HUVECs。取传3代、对数生长期、生长状态良好的HUVECs，随机分为Control组与LPS组以及Control组、LPS组、LPS+si-NC组、LPS+si-circ＿0001879组，LPS+si-NC组、LPS+si-circ＿0001879组经1μg/mL LPS处理24 h后分别予si-NC、si-circ＿0001879转染，LPS组仅予LPS处理，Control组不予转染且未经LPS处理。收集细胞，采用RT-qPCR法检测circ＿0001879、miR-599表达，采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达，按相关试剂盒说明检测乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等氧化应激损伤指标含量。通过CircInteractome网站预测circ＿0001879与miR-599的靶向调控关系。WT-circ＿0001879和MUT-circ＿0001879分别与miR-NC和miR-599共转染HUVECs，按双荧光素酶报告基因检测试剂盒说明检测荧光素酶活性。结果 LPS组circ＿0001879相对表达量显著高于Control组，miR-599相对表达量显著低于Control组（t分别为15.960、14.152,P均<0.01）。与Control组比较，LPS组和LPS+si-NC组circ＿0001879相对表达量、细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量以及LDH、MDA含量均显著升高，而Bcl-2蛋白相对表达量以及SOD、GSH-Px含量均显著降低（P均<0.05）；与LPS组和LPS+si-NC组比较，LPS+si-circ＿0001879组circ＿0001879相对表达量、细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量以及LDH、MDA含量均显著降低，而Bcl-2蛋白相对表达量以及SOD、GSH-Px含量均显著升高（P均<0.05）。经CircInteractome网站预测，circ＿0001879与miR-599存在互补的核苷酸序列；与转染miR-NC+WT-circ＿0001879的HUVECs细胞比较，转染miR-599+WT-circ＿0001879的HUVECs细胞荧光素酶活性显著降低（t=17.483,P<0.05），而转染miR-NC+MUTcirc＿0001879、miR-599+MUT-circ＿0001879的HUVECs细胞荧光素酶活性比较差异无统计学意义（t=0.246,P>0.05）。结论 circ＿0001879可能通过靶向调控miR-599缓解LPS诱导的HUVECs氧化应激损伤。

• 出版日期2023
• 单位中国人民解放军空军军医大学; 唐都医院