尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA的分离及反转录验证

作者：李超; 陈明; 黄维义; 王瑞; 余晓丽; 黄婷; 雷爱莹; 梁万文

来源：淡水渔业, 2010, (02): 19-23.

• 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)
• 外周血白细胞
• 总RNA
• mRNA
• 冻干浓缩 Oreochromis niloticus
• peripheral leukocytes
• total RNA isolation
• mRNA
• freez-dry

应用Trizol一步法对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)外周血白细胞总RNA提取方法进行优化,通过β-ac-tin基因反转录对所分离到的总RNA进行质量验证,并对mRNA的冻干浓缩进行了探讨,确定了一套快速、高效的尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA分离和mRNA浓缩体系。结果显示:获得的总RNA纯度较高,OD260/OD280均在1.9~2.0之间;甲醛变性电泳显示,总RNA完整性良好,28S与18S比值为2∶1;总RNA的分离量与起始白细胞量成正比,每毫升Trizol最大裂解量为1×108个白细胞,可得到总RNA量约为90μg;总RNA的分离量在前四个小时随着沉淀时间的增...

• 出版日期2010
• 单位中国水产科学研究院淡水渔业研究中心; 广西大学; 广西壮族自治区水产科学研究院