牛细小病毒DPO-PCR检测方法的建立

作者：王孟孟; 李振雪; 汤婷婷; 王瑞翀; 王丽; 徐义刚; 唐丽杰; 李一经; 乔薪瑗^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(03): 269-273.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0045

• 牛细小病毒
• DPO-PCR
• 快速检测

为建立牛细小病毒的快速检测方法,以牛细小病毒VP2基因为靶基因,设计了1对双启动寡核苷酸(dual-priming oligonucleotide,DPO)引物,建立了牛细小病毒DPO-PCR快速检测方法。退火温度不敏感试验、特异性试验和灵敏度试验的结果显示,与常规PCR方法相比,DPO-PCR方法在41～65℃退火温度范围内均能够高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感;该方法的最低检出量为3.94×103copies/uL;通过对牛细小病毒、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒进行检测,只有牛细小病毒的检测结果为阳性,且无非特异性扩增。结果表明,建立的DPO-PCR方法同传统PCR方法相比,特异性强、灵敏度高,为牛细小病毒的快速检测提供了一种新方法。

• 出版日期2019
• 单位黑龙江省疾病控制中心; 东北农业大学