Smad4基因对人类胃癌细胞株血管生成相关因子影响的研究

作者：程时丹; 高峰; 王晓瑾; 乔敏敏; 吴云林

来源：中华消化杂志, 2009, 29(6): 385-388.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-1432.2009.06.006

• 胃肿瘤
• 细胞系
• 肿瘤
• 血管内皮生长因子
• 凝血酶敏感蛋白1
• Smad4

目的 研究Smad4基因对人类胃癌细胞株血管生成相关因子的影响.方法 构建Smad4 真核表达载体pcDNA3.1(-)-Smad4质粒,并用脂质体介导转染方法将pcDNA3.1(-)-Smad4质粒和空载质粒pcDNA3.1(-)导入培养的Smad4基因表达缺失的胃癌MKN28细胞株中,经G418筛选,获得稳定表达Smad4基因的Smad4+-MKN28细胞和作为对照的Smad4--MKN28 细胞.分别应用逆转录(RT)-PCR法和Western印迹法检测体外培养亲本细胞、Smad4+-MKN28 细胞和Smad4--MKN28细胞的血管内皮生长因子(VEGF)和凝血酶敏感蛋白1(TSP1)基因的mRNA和蛋白的表达.结果 RT-PCR结果显示,VEGF在稳定转染pcDNA3.1(-)-Smad4重组质粒的Smad4+-MKN28细胞(0.41±0.14)较亲本细胞(0.71±0.45)和转染空载质粒的Smad4--MKN28细胞(0.76±0.28)表达明显下降(P<0.05),而TSP1的表达明显增高(分别为0.71±0.45、0.41±0.14和0.76±0.28,P值均<0.05),Western印迹结果示其编码蛋白也出现相应的变化.结论 恢复Smad4表达后此细胞株促进血管生成的基因表达下降,抑制血管生成的基因表达上调,提示Smad4基因可能通过抑制肿瘤血管生成而使肿瘤的生长受到抑制.

• 出版日期2009
• 单位上海交通大学医学院附属瑞金医院