登革病毒NS1蛋白的原核表达及其在登革热快速诊断中的应用

作者：傅强; 田疆; 方丹云; 周俊梅; 庞贤武; 李兴华; 江丽芳

来源：中山大学学报(医学科学版), 2012, (03): 316-321.

DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2012.0060

• 登革病毒
• NS1蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体 DENV
• NS1 protein
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

【目的】重组表达1型登革病毒(DENV-1)和3型登革病毒(DENV-3)NS1蛋白,制备多克隆抗体,建立特异、敏感的登革病毒NS1抗原ELISA检测法。【方法】RT-PCR扩增DENV-1和DENV-3 NS1全长基因,经T-A克隆后,将目的基因分别与质粒PET30a( )连接构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。阳性克隆经IPTG诱导表达,并对目的蛋白进行纯化。用纯化的NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,制备鼠抗NS1多克隆抗体。应用NS1多克隆抗体建立登革病毒NS1抗原双抗体夹心ELISA检测法。【结果】成功构建了高效表达DENV-1和DENV-3 NS1蛋白的原核表达系统,获得纯化...

• 出版日期2012
• 单位中山大学