OGT多克隆抗体的制备及特异性分析

作者：张迪; 张瑜; 陈丹阳; 陈博雅; 修玉宗; 于文功; 顾玉超

来源：现代生物医学进展, 2016, (03): 414-418.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2016.03.003

• OGT
• 多克隆抗体
• ELISA
• Western blotting OGT
• Polyclonal antibody
• ELISA
• Western blotting

目的:为了探讨O-GlcNAc糖基转移酶OGT的生理和病理作用,需制备能高效特异性检测OGT的抗体。方法:在NCBI数据库中,查找人源OGT基因序列,根据OGT的结构特点,选取OGT的C末端催化结构域中的一段多肽序列(464-949位点氨基酸)做抗原。首先,构建OGT的C末端催化结构域(464-949位点氨基酸)的重组表达载体pET30-a-OGT-C,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达融合His标签的OGT-C蛋白,Ni+珠亲和层析法纯化提取OGT-C蛋白。再以OGT-C重组蛋白作为抗原,免疫Wistar大鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA法检测OGT抗体的效价...

• 出版日期2016
• 单位中国海洋大学