大鼠Fcε3-4基因克隆及原核表达

作者：张艳芬; 时海浪; 王培莹; 乔晓强; 刘中成

来源：河北大学学报(自然科学版), 2012, (04): 387-392.

• 大鼠
• Fcε3-4基因
• 克隆
• 表达
• 免疫特异性 rat
• Fcε3-4 gene
• clone
• expression
• immunologic specificity

为了获得重组Fcε3-4蛋白,从变态反应性哮喘大鼠脾组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法克隆大鼠Fcε3-4基因,构建成原核表达载体pET17b-Fcε3-4,并转化大肠杆菌进行诱导表达,Fcε3-4蛋白主要以包涵体形式存在.经Ni-NAT亲和层析柱对尿素溶解的Fcε3-4蛋白进行了纯化,并利用降低尿素梯度的方法柱上对纯化蛋白进行了复性.经Western Blotting和ELISA鉴定,Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特异性,能被抗大鼠Fcε抗体特异性识别,为下一步研究该蛋白奠定了基础.

• 出版日期2012
• 单位河北大学