柯萨奇B组3型病毒SYBR Green Ⅰ RT-PCR检测方法的建立

作者：张伟; 李咏洁; 杨凤梅; 李艳艳; 靳玮华; 徐鸿界; 李明学; 刘权; 赵远; 和占龙^*

来源：医学研究杂志, 2022, 51(01): 55-59.

• 柯萨奇病毒B组3型
• SYBR GreenⅠ
• RT-PCR

目的 建立一种灵敏、特异的柯萨奇B组3型(CV-B3)病原SYBR GreenⅠRT-PCR实时荧光定量检测方法，用于快速、准确地检测CV-B3。方法 设计柯萨奇B组病毒通用引物以及VP1基因的T7启动子特异性引物，以体外转录获得的RNA为标准品，绘制标准曲线，建立CV-B3的荧光定量PCR检测方法；对检测方法的敏感度、特异性、重复性进行评价。结果该检测方法在10～109拷贝/微升范围内具有良好的扩增效率和线性关系，最低检测限为10拷贝/微升，标准曲线r2=0.999,扩增效率为95.7%;且对柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)、柯萨奇病毒A组10型(CV-A10)、肠道病毒71型(EV-71)均无交叉反应，重复性实验变异系数(CV%)<2%。结论 本实验建立的检测方法敏感度较高，同时具备良好的特异性及重复性，可用于CV-B3病原的临床及实验室样本的定性定量检测。

• 出版日期2022
• 单位中国医学科学院医学生物学研究所