K.paraultunense角蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究

作者：羊希; 李霞; 姜河; 廖学品^*; 石碧

来源：皮革科学与工程, 2019, 29(03): 5-11.

DOI：10.19677/j.issn.1004-7964.2019.03.001

• K.paraultunense
• 角蛋白酶
• 分离纯化
• 酶学性质

将角蛋白降解菌Keratinibaculum paraultunense(K.paraultunense)所产角蛋白酶的粗酶液,依次通过硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose-FF阴离子交换以及Superdex 75凝胶色谱层析等分离纯化,最终得到一种电泳纯的角蛋白酶。其纯化倍数为14.55,回收率为7.24%。SDS-PAGE分析结果表明该酶的相对分子质量约为29 KDa。酶学性质研究表明,该酶最适作用温度为80℃;最适pH为7.5,在pH 6.0～9.0范围内酶活力较为稳定;当以酪蛋白为底物时,该酶的动力学常数Km为4.37 mg·mL-1,Vm为14 556 U·(mg·min)-1,而当以羊毛角蛋白为底物时,该酶的动力学常数Km为15.66 mg·mL-1,Vm为2610 U·(mg·min)-1;Ca2+对酶活有明显的促进作用,但苯基甲基磺酰氟(PMSF)对酶活有较强的抑制作用。

• 出版日期2019
• 单位四川大学