鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

作者：王勇; 殷冬冬; 宫晓华; 王瑞; 许漩; 唐井玉; 兰梦蝶; 王桂军

来源：中国微生态学杂志, 2016, (02): 141-145.

DOI：10.13381/j.cnki.cjm.201602005

• 鸭坦布苏病毒
• E蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体 Duck tembusu virus
• Envelope protein
• Prokaryotic expression
• Polyclonal antibodies

目的用RT-PCR技术扩增鸭坦布苏病毒(DTMUV)AH-F10株E基因,并克隆至pET32a(+)载体,构建重组表达质粒pET32a-E,表达E蛋白。方法重组表达质粒转化感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导后,获得含6个His标签的融合蛋白,大小约54kDa。表达的蛋白以包涵体形式存在。对目的蛋白进行纯化,用纯化的E蛋白免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体血清。结果SDS-PAGE和Western blot试验结果表明E基因在大肠埃希菌中成功表达,并能与抗DTMUV多克隆抗体产生特异性反应,具有良好的反应原性。间接免疫荧光试验表明免疫小鼠后获得的多克隆抗体能与DTMUV反应。结论本研...

• 出版日期2016
• 单位安徽农业大学