青蒿琥酯和双氢青蒿素对华支睾吸虫所致小鼠肝纤维化的治疗作用研究

作者：汤宪时; 梁幼生; 许永良; 吴潇潇; 季文翔^*; 仝德胜^*

来源：中国人兽共患病学报, 2022, 38(12): 1098-1105.

• 华支睾吸虫
• 肝纤维化
• 青蒿琥酯
• 双氢青蒿素

目的 观察和评估青蒿琥酯(ART)和双氢青蒿素(DHA)对华支睾吸虫所致小鼠肝纤维化的治疗作用。方法 BALB/c小鼠35只，每只小鼠灌胃感染30个华支睾吸虫囊蚴，饲养30 d,建立小鼠华支睾吸虫病肝纤维化模型，随机分为7组，即青蒿琥酯组(ART组)、氯化钠组(NaCl组)、吡喹酮组(PZQ组)、吡喹酮+青蒿琥酯组[(PZQ+ART)组]、双氢青蒿素组(DHA组)、聚氧乙烯蓖麻油组(EL组)、吡喹酮+双氢青蒿素组[(PZQ+DHA)组],每组5只小鼠。采用腹腔注射法(ART)和经口灌胃法(DHA),用药剂量都为20 mg/kg,每天1次，连续用药30 d,合并PZQ用药组于感染华支睾吸虫囊蚴30 d后300 mg/kg PZQ连续灌胃治疗2次。取各组小鼠肝组织，应用苏木精-伊红(HE)和马松(Masson)染色显示小鼠肝组织病理学变化和胶原增生情况，应用荧光定量PCR和Western Blot检测肝组织α-SMA、TGF-β、Col I、Col III mRNA和蛋白表达，应用肝功检测试剂盒测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)含量。结果 HE和Masson染色显示小鼠感染华支睾吸虫囊蚴30 d后肝脏汇管区有炎性细胞浸润，周围出现大量胶原纤维，有肝纤维化形成；Western Blot结果显示，感染组小鼠肝脏Col III表达量(1.26±0.01)高于未感染组(0.75±0.14)(t=2.01,P<0.05)。荧光定量PCR结果显示，接受ART和DHA治疗的小鼠与各自对照组相比，各纤维化相关基因mRNA表达水平没有显著差异。Western Blot结果显示，接受ART治疗后，ART组(0.32±0.04、0.81±0.09)和(PZQ+ART)组(0.16±0.01、1.02±0.18)的Col I、Col III蛋白表达水平都低于NaCl组(1.54±0.38、2.24±0.35),而且PZQ+ART组的Col I表达水平低于ART组(t=1.98,P<0.05);接受DHA治疗的小鼠α-SMA、Col I蛋白表达水平与对照组比较没有显著差异。肝功能检测结果显示，ART组(197.75±8.84)U/L和(PZQ+ART)组(234.66±42.54)U/L血清AST水平与NaCl组(150±20.29)U/L比较明显升高；(PZQ+DHA)组(29±12.98)U/L血清ALT水平较EL组(107.25±54.26)U/L和PZQ组(58±8.71)U/L降低，(PZQ+DHA)组(143±27.43)U/L)血清AST水平较EL组(207±42.48)U/L降低(t=0.75,P<0.05)。结论 青蒿琥酯(ART)在20 mg/kg剂量下对华支睾吸虫所致小鼠肝纤维化有治疗作用，合并杀虫抗纤维化效果更好，但对肝功有一定影响。双氢青蒿素(DHA)在20 mg/kg剂量下没有明显改善小鼠肝纤维化，但合并吡喹酮(PZQ)可以起到一定程度保肝作用。

• 出版日期2022
• 单位江苏省血吸虫病防治研究所