梅山猪LH-β基因真核表达系统的构建及体内外转染表达效果的研究

作者：吕学斌李江凌高荣武梅杨毅王丽焕刘世贵

来源：畜牧兽医学报, 2005, (09): 877-881.

• 猪
• LH-&beta
• 基因
• 真核表达
• 转染
• 生殖
• 小鼠 pig
• porcine LH-&beta
• gene
• mouse
• eukaryotic expression
• transgenic expression
• reproduction

将克隆的梅山猪LH-β基因亚克隆到真核表达型载体VR1020上,通过质粒PCR的方法在转化子中筛选阳性克隆,用BamHⅠ、BglⅡ双酶切鉴定重组子。得到的重组真核表达质粒转染Cos7细胞株,RT-PCR检测猪LH-β表达情况。然后用VPLH-β质粒、VR1020分别肌肉注射小鼠,研究了小鼠的生殖特性情况。结果显示:通过质粒PCR和双酶切分析,得到猪LH-β基因以正确方向插入的重组真核表达质粒VPLH-β。重组质粒VPLH-β经脂质体介导转染Cos7细胞,培养不同时间后提取mRNA进行RT-PCR,发现转染细胞RNA中含有与LH-β基因对应的mRNA;结果表明已成功构建了PLH-β的真核表达质粒...

• 出版日期2005
• 单位四川大学; 四川省畜牧科学研究院