摘要

目的探索去氢木香内酯(DHCL)对胃癌细胞SGC-7901自噬、凋亡及氧化应激的影响。方法将体外培养SGC-7901细胞分为DHCL 0μmol/L组、DHCL 10μmol/L组、DHCL 20μmol/L组和DHCL 40μmol/L组。CCK-8法检测各组细胞增殖,免疫荧光检测细胞自噬活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞上清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平;Western blot检测LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin 1、自噬相关蛋白7(ATG7)、p62、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)、截短型Bid(tBid)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(Caspase-8)、Caspase-9、Caspase-3、裂解的Caspase-8(cleaved Caspase-8)、cleaved Caspase-9和cleaved Caspase-3蛋白表达。皮下种植0.2 mL SGC-7901细胞悬液(1×107/mL),经DHCL(腹腔注射20 mg/(kg·d),2周)干预后,进行移植瘤组织称重。结果 DHCL 40μmol/L组和DHCL 20μmol/L组细胞存活率低于DHCL 0μmol/L组(P<0.05),细胞自噬活性和细胞凋亡率高于DHCL 0μmol/L组(P<0.05),细胞SOD和GSH-Px水平低于DHCL 0μmol/L组(P<0.05),MDA和ROS水平高于DHCL 0μmol/L组(P<0.05),细胞p62蛋白表达低于DHCL 0μmol/L组,Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、ATG7、Bax/Bcl-2、tBid/Bid、cleaved Caspase-8/Caspase-8、cleaved Caspase-9/Caspase-9和cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白表达高于DHCL 0μmol/L组(P<0.05);裸鼠移植瘤结果显示,DHCL组裸鼠移植瘤质量低于对照组(P<0.05)。结论 DHCL可以促进SGC-7901细胞内ROS产生,诱导细胞自噬性死亡和凋亡。