摘要

目的构建含幽门螺杆菌细胞毒素相关基因 A(CagA)基因片段的绿色荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-CagA。方法从幽门螺杆菌细胞株中扩增出 CagA 基因片段,经回收、纯化,连接到质粒 pGEM-T 上,测序、酶切后与质粒 pEGFP-C3连接,脂质体法将 pEGFP-C3-CagA 转染入胃癌细胞株BGC823,用荧光显微镜观察转染的细胞。结果通过测序、酶切证明 CagA 插入质粒正确,构建出载体 pEGFP-C3-CagA,转染后经荧光显微镜观察到胃癌细胞株 BGC823中有绿色荧光。结论成功构建表达 CagA 的真核绿色荧光载体。