埃博拉病毒苏丹型核蛋白的原核表达及纯化

作者：王雪敏; 王皓婷; 邱亚峰; 史子学; 魏建超; 邵东华; 王志亮; 马志永

来源：中国兽医科学, 2011, (02): 159-162.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2011.02.008

• 埃博拉病毒
• 核蛋白
• 原核表达
• 蛋白纯化 Ebola virus
• nucleoprotein
• prokaryotic expression
• protein purification

将目的基因NP亚克隆入原核表达质粒pET-28(a)中,构建了重组表达载体pET-28(a)-S-NP,然后用重组质粒转化BL21(DE3)感受态细菌,并利用IPTG诱导蛋白表达。将表达的蛋白利用His-Band Ni 柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果显示,重组质粒经双酶切后可得到与目的片段长度相同的特异性条带;测序结果显示此特异性条带与参考序列完全匹配,没有突变。纯化后的蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定,表达正确。结果表明,成功构建了重组表达质粒,且表达产物正确。

• 出版日期2011
• 单位中国农业科学院上海兽医研究所; 中国动物卫生与流行病学中心; 河北工程大学