亲水作用色谱法测定组织中全基因组DNA甲基化水平

作者：张良滔; 张立坚; 张俊杰; 刘春安; 蔡春

来源：色谱, 2011, (04): 342-345.

• 亲水作用色谱
• 全基因组DNA甲基化
• 组织
• 结肠癌 hydrophilic interaction liquid chromatography(HILIC)
• global DNA methylation
• tissues
• colon cancer

建立了亲水作用色谱(HILIC)测定组织中全基因组DNA甲基化水平的方法。采用苯酚-氯仿提取组织中的DNA,提取的DNA用88%甲酸在140℃下裂解,经N2吹干后,加乙腈-水(9∶1,v/v)溶解,用Waters BEH HILIC柱进行分离,在277nm波长下检测胞嘧啶(Cyt)及5-甲基胞嘧啶(5-mCyt)含量。结果表明,以乙腈-10mmol/L甲酸铵溶液(94∶6,v/v)为流动相,流速为0.5mL/min,Cyt与5-mCyt分离较好,保留时间分别为2.6与3.1min。胞嘧啶的线性范围为1~900μmol/L,相关系数为0.999 9;5-甲基胞嘧啶的线性范围为1~64μmol/L...

• 出版日期2011
• 单位广东医科大学