米曲霉酸性蛋白酶基因在毕赤酵母中的异源表达及酶学性质

作者：岳晓平; 陈朋; 朱玥明; 曾艳^*; 刘汉民; 刘红彦; 王敏; 孙媛霞

来源：生物工程学报, 2019, 35(03): 415-424.

DOI：10.13345/j.cjb.180321

• 米曲霉
• 酸性蛋白酶
• 毕赤酵母
• 异源表达
• 酶学性质

酸性蛋白酶作为一类重要的天冬氨酸蛋白酶,被广泛应用于食品、医药和皮革等领域。为推动酸性蛋白酶的研究及应用,通过对发酵豆制品样品进行宏基因组测序,从中获得米曲霉酸性蛋白酶基因pepA,在毕赤酵母GS115中进行异源表达,并对重组酶PepA进行酶学性质分析。结果显示毕赤酵母发酵上清液中酸性蛋白酶的活性为50.62 U/mL。SDS-PAGE验证PepA的分子量约为50 kDa,且发酵上清液几乎无杂蛋白。PepA的最适pH值为4.5,最适温度为50℃,Mn2+和Cu2+对其具有激活作用,而Fe3+、Fe2+与Ca2+则具有抑制作用。上述研究结果可为米曲霉酸性蛋白酶的异源表达及其相关工业应用提供指导。

• 出版日期2019
• 单位天津科技大学; 生物工程学院; 中国科学院天津工业生物技术研究所