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摘要
目的建立一种方便、快速且灵敏度高、特异性强的日本血吸虫(SJ)感染性钉螺检测方法。方法 PCR扩增SJ基因片段,并将其克隆到T载体构建阳性参照物;建立SJ核酸恒温扩增反应体系,并通过检测经等比稀释的阳性参照物和相关样本基因组DNA分析其灵敏度和特异性;设计相应的核酸纯化方法,组装SJ感染性钉螺检测试剂,并通过检测钉螺样本对其进行验证。结果获得长度213 bp的PCR扩增产物,并用该扩增产物构建了重组T载体,即阳性参照物;建立了SJ核酸恒温扩增反应体系,该体系可根据颜色变化判定扩增结果,且灵敏度和特异性良好;组装了SJ感染性钉螺检测试剂,该试剂可检测出含1%阳性钉螺的钉螺样本。结论成功建立了一种可视化的SJ感染性钉螺检测方法,并通过应用对其进行了验证。
- 出版日期2016
- 单位军事医学科学院基础医学研究所; 湖南康润药业有限公司; 湖南省血吸虫病防治所
