摘要

目的检测微小RNA(miR)-199在胃癌组织以及胃癌细胞株的表达,探讨miR-199对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应技术检测miR-199在51例胃癌组织和配对癌旁组织以及胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达,建立miR-199过表达或低表达的胃癌细胞株,采用细胞增殖实验、细胞迁移实验、蛋白免疫印迹技术检测胃癌细胞的增殖、迁移能力的变化及其相关机制。结果 miR-199在胃癌组织中的相对表达量显著低于配对的癌旁组织,差异有统计学意义(0.2635±0.0303比1.6700±0.9613,t=13.95,P<0.001);在胃癌细胞株AGS(0.81,t=9.13,P<0.001)、SGC-7901(0.83,t=8.88,P<0.001)、MKN28(0.58,t=10.80,P<0.001)、KATO-Ⅲ(0.60,t=10.31,P<0.001)、MKN-45(0.27,t=13.10,P<0.001)中的相对表达量显著低于正常胃黏膜上皮细胞GES-1(2.1),差异有统计学意义;在胃癌细胞株MKN-45中,高表达miR-199组细胞的增殖能力、迁移能力较对照组胃癌细胞显著降低,差异有统计学意义(731±13比345±18,t=24.90,P<0.001);在胃癌细胞KATO-Ⅲ中,低表达miR-199组细胞的增殖能力、迁移能力较对照组胃癌细胞显著增强,差异有统计学意义(257±16比657±8,t=32.59,P<0.001)。双荧光素酶报告实验显示miR-199可以直接作用于TBL1XR1的3’非翻译区,调控TBL1XR1的表达。Western blot结果显示高表达miR-199后,TBL1XR1表达水平降低。结论 miR-199在胃癌组织中呈低表达,可能与胃癌细胞的增殖和迁移能力有关,miR-199的作用可能是通过调控TBL1XR1实现的。