摘要

探讨大黄酸对人肾小管上皮细胞系HK-2的毒性作用及毒性作用机制。以Hg Cl2为阳性对照,通过MTT法检测细胞活力,LDH释放实验检测细胞毒性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Real-Time q PCR检测Fas,Fas L,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达,Western blot检测Fas,Fas L,胞浆Cyt-c,caspase-3,caspase-8,caspase-9蛋白表达。实验结果显示:大黄酸可剂量依赖性地抑制HK-2细胞活力,增加LDH释放和细胞凋亡率,使Fas,Fas L,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达显著性上调,Fas,Fas L,胞浆Cyt-c蛋白表达量显著升高,caspase-8原型表达显著降低,caspase-3,caspase-8裂解片段表达显著增加,caspae-9表达无变化。结果证明:大黄酸体外对HK-2细胞具有毒性作用,其毒性作用机制可能是通过Fas途径诱导HK-2细胞凋亡。