【目的】考察铁皮石斛多糖提取方法及不同产地多糖含量的差异。【方法】采用正交试验设计筛选料液比、提取时间、提取次数对铁皮石斛多糖提取率的影响。【结果】铁皮石斛多糖提取最佳工艺条件为料液比1∶40,提取时间2 h,提取次数3次;分析云南省不同产地的铁皮石斛多糖含量,结果表明景洪勐龙的含量最高,可达到45.23%。【结论】获得铁皮石斛多糖提取的最佳工艺条件,不同产地的铁皮石斛多糖含量存在较大差异。