在已构建的能在低温菌和E.coli中正常复制的启动子探针质粒的基础上,筛选到了强启动子,通过RT-PCR评估了启动子活性,并通过引物延伸实验确定了转录起始位点和启动子核心序列。利用其中最强的启动子构建了低温蛋白表达质粒,使一个热不稳定α-淀粉酶在低温下(7℃)得到了高效表达,表达量达胞外总蛋白的35%。显示出该表达系统具有高效表达热不稳定蛋白质的潜在应用价值。
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