农杆菌介导枳壳转化系统的建立及PCR鉴定

作者：贺红; 韩美丽; 李耿光

来源：中草药, 2003, (02): 79-82.

• 农杆菌
• 枳壳
• 遗传转化
• 聚合酶链式反应(PCR)

目的　建立农杆菌介导的枳壳转化体系。方法　以枳壳实生苗上胚轴为转化外植体 ,农杆菌 Ti质粒上插入了外源目的基因——柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因 (CTV - cp) ,转化植株用 GUS (β-葡萄苷酸酶 )染色及 PCR进行鉴定。结果　枳壳转化试验中 ,2 0 d苗龄的外植体转化再生率较高 ;外植体与农杆菌共培养时间以 2～ 3d为宜 ;乙酰丁香酮能较大提高转化效率 ,转化再生频率为 2 7.5 %。转化获得的抗性植株中 ,GU S反应呈阳性所占比例为 70 .0 %。 PCR分析证实外源目的基因已整合到枳壳转化株的核基因组中。结论　成功地建立了农杆菌介导的枳壳转化系统 ,为利用基因工程的手段进行枳壳的抗病育种奠定了基础。

• 出版日期2003-2-25
• 单位广西壮族自治区林业科学研究院; 广州中医药大学