抗炭疽保护性抗原单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析

作者：李冰; 李建民; 徐俊杰; 刘树玲; 张羽; 付玲; 陈薇

来源：生物技术通讯, 2007, (02): 179-182.

• 炭疽芽胞杆菌
• 单克隆抗体
• 基因克隆
• 序列测定

目的:克隆并分析抗重组炭疽芽孢杆菌保护性抗原(rPA)单克隆抗体4B2、5E1和2A8轻、重链可变区基因。方法:从分泌抗rPA特异性单抗的杂交瘤细胞株4B2、5E1和2A8中提取总RNA;利用RT-PCR技术克隆抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,并将其连入pMD18-T载体中进行测序分析。结果:4B2VL基因全长378bp,VH基因全长414bp;5E1VL基因全长420bp,VH基因全长426bp;2A8VL基因全长384bp,VH基因全长342bp。通过分析,这些基因均符合小鼠IgGV区基因的特征,含有4个框架区、3个抗原互补决定区,而且抗体特征性的半胱氨酸残基的数量和位置也正确。结论:克隆了抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,为下一步构建多种形式的基因工程抗体奠定了良好的基础。

• 出版日期2007
• 单位病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院