Alu-PCR检测人肝癌细胞株PLC/PRF/5基因组中乙型肝炎病毒DNA的整合

作者：邱爽; 张会英

来源：医学研究杂志, 2015, 44(04): 88-41.

• 肝癌
• Alu-PCR
• 乙型肝炎病毒DNA
• 整合

目的应用Alu-PCR方法检测人肝癌细胞株PLC/PRF/5基因组中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的整合。方法提取经培养扩增的人肝癌细胞株PLC/PRF/5基因组DNA,根据Alu-PCR方法经过3轮PCR反应扩增潜在的HBV DNA和人基因组DNA整合片段。琼脂糖凝胶电泳观察PCR扩增产物片段,切取并纯化整合阳性的电泳条带,对纯化产物进行核酸测序,得到整合片段的核苷酸序列。结果经琼脂糖凝胶电泳检测,用Alu-PCR方法能够从PLC/PRF/5细胞株中扩增得到4条HBV DNA整合序列,经测序后与比对其中3条整合序列能够定位于人染色体03p21.31、05p15.33、12q13.12q14.1。结论 AluPCR可以准确测定肝细胞中HBV DNA的整合,为研究HBV DNA在肝细胞中的整合研究提供了一个简单、经济的方法。

• 单位
  北京积水潭医院