摘要

目的建立检测癌胚抗原化学发光免疫定量分析方法。方法采用双抗体异位点一步夹心法,以癌胚抗原单克隆抗体作为固相包被,采用改良过碘酸钠法进行癌胚抗原多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体;以金刚烷胺衍生物CSPD作为底物,优化CSPD与SapphireⅡ发光体系;用国家标准品校定定量标准品,建立了人血清CEA的化学发光免疫定量分析法。用该法检测800份正常人血清,确定参考值范围,将临床血清标本100份与bayerAcs:180全自动发光系统进行比较。结果本方法的最低检出量为0.5 ng/mL,线性范围0.5~640.0ng/mL,批内和批间的变异率分别为8.6%和7.5%,回收率在97.4%~101.8%之间。与AFP(3μg/mL)的交叉≤0.015%;与铁蛋白(10μg/mL)≤0.034%;与人血清白蛋白(200 g/L)≤4.5×10-8,与人血清丙球蛋白(100 g/L)≤5.0×10-8,与bayerAcs:180比较相关系数r=0.968(P<0.001)。结论建立的癌胚抗原化学发光免疫分析法可常规用于临床检测。