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摘要
目的 基于重组酶介导的等温扩增技术(recombinase-aided amplification, RAA)开发一种快速、准确的人腺病毒14型检测方法。方法 根据人腺病素14型(human adenovirus serotype 14, HAdV-14)的Hexon基因序列，使用Primer 6.0软件设计特异性引物及探针，并构建阳性质粒标准品，优化反应条件，建立一种快速RAA检测方法，并对该方法的灵敏度及特异度进行评价。收集2017～2022年中国人民解放军联勤保障部队第九〇三医院发热性呼吸综合征患者的咽拭子50份，应用建立的实时荧光RAA测定法进行检测，结果与实时荧光PCR检测结果进行比较。结果 最终确定了最佳引物探针组合为HAdV14-F1-4,HAdV14-R1和HAdV14-P；经反应条件优化，40℃进行RAA扩增效果最佳；该方法灵敏度为101 copies/μl，当质粒标准品浓度为104,103,102和101 copies/μl时，批内变异系数均<5%;50例临床样本中HAdV-14的检测结果与实时荧光PCR一致。结论 建立了一种基于RAA技术的HAdV-14快速检测方法，可以在仅有简单恒温设备的条件下检测HAdV-14。
- 出版日期2023
- 单位蚌埠医学院
