INO启动子克隆及胚珠特异表达载体的构建

作者:刘娜; 刘兴地; 李明芳; 郑学勤
来源:中国农学通报, 2012, 28(27): 189-193.
DOI:10.3969/j.issn.1000-6850.2012.27.037

摘要

为了观察转基因植株胚珠特异性表达,采用CTAB法提取拟南芥基因组DNA,构建了35S::pCAMBIA1304-L117载体并对番茄进行遗传转化。根据已报道的INO启动子序列设计并合成一对特异引物,通过PCR对启动子进行扩增、连接并对其进行测序,结果表明:与GenBank中已注册的INO启动子序列的同源性为100%,并且构建了以INO代替CAMV35S启动子的pCAMBIA1304-L117植物表达载体,采用冷冻法将其转入根癌农杆菌EHA105。成功构建了35S::pCAMBIA1304-L117载体,并为进一步检测奠定了基础。

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