摘要

【方法、目的】利用PCR方法从丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonas syringaepv.glycinea)Psg12菌株中克隆到1026 bp的hrp基因。将其定向插入到表达载体pGEX-4T-1上,并转化宿主菌BL21,IPTG诱导表达后,SDS-PAGE显示其表达产物为分子量为61 kDa的融合蛋白质。【结果】该蛋白质在性质与功能上类似于已发现的harpins,即富含甘氨酸、不含半胱氨酸,热稳定以及对蛋白酶K敏感,能够在烟草上引起典型的过敏性反应,过敏性反应还可被真核生物代谢抑制剂抑制。序列比较发现该基因与日本的Psg r0菌的hrpZ相似性为79%,与GenBank已公布的其它hrpZ的相似性为79%~99%,与其他革兰氏阴性植物病原细菌不存在相似性。【结论】本实验从丁香假单胞菌大豆致病变种(P.syringaepv.glycinea)Psg12菌株中克隆到新的hrpZ基因,并成功表达,这是国内首次从P.syringaepv.glycinea菌株中克隆到hrpZ基因。

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