铁皮石斛均一化全长cDNA文库的构建与序列分析

作者：蒋敏; 王江; 文国松; 徐绍忠; 查应洪; 容天聚; 钱雄

来源：中国中药杂志, 2013, (04): 504-510.

• 铁皮石斛
• 均一化
• cDNA文库
• 序列分析 Dendrobium officinale
• normalization
• cDNA library
• sequence analysis

目的:为了获得药用植物铁皮石斛功能基因的信息和筛选功能基因。方法:以SMART(switching mechanism at5'end of RNA transcript)方式合成全长cDNA,结合DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建铁皮石斛茎组织的均一化全长cDNA文库。结果:该文库重组率为93.9%,文库滴度1.3×106cfu.mL-1,插入片段平均大小1.5 kb左右。随机挑取163个阳性克隆进行单侧测序,通过生物信息学分析,获得150个单一序列,其中147个序列与相应的同源蛋白匹配,GO(geneontology)分类表明这些序列参与各种生化途径...

• 出版日期2013
• 单位云南农业大学; 中国科学院上海生命科学研究院