甘薯羽状斑驳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：王丽; 王振东; 乔奇; 秦艳红; 张德胜; 田雨婷; 王爽; 张立军; 张振臣

来源：沈阳农业大学学报, 2013, (02): 129-135.

• 甘薯羽状斑驳病毒
• 实时定量PCR
• 荧光探针 Sweet potato feather mottle virus(SPFMV)
• real-time PCR
• TaqMan probe

依据甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因的保守区设计引物和TaqMan探针,经过对反应体系和反应条件的优化,建立了特异、灵敏、高效的SPFMV实时荧光定量PCR检测方法。试验结果表明:该方法能检测到目的病毒,标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.307和0.998,扩增效率为100.6%。最低可检测到约5.46个拷贝的阳性质粒,灵敏度比常规PCR高2个数量级。建立的实时荧光定量PCR方法可用于田间样品的检测,为SPFMV的早期预警和流行学研究提供了技术手段。

• 出版日期2013
• 单位河南省农业科学院; 沈阳农业大学